western blot能否测效价？

2025-12-06 13:02:50

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回答1：

不行！
因为western blot属于蛋白质杂交，是关于多克隆抗体量的测定。实际上，效价更多的是宏观上的，不紧紧是量的关系，还设计到测定条件、检测系统等影响，因此，单独用western blot是不能测定效价！
但是，可以用western blot初步估测其效价！

回答2：

行。
以下为例：供参考
用Western blot检测MUC1核心肽多克隆
抗体特异性：将纯化的8R．MUCPT蛋白(2孔)经
SDS—PAGE后，转移至硝酸纤维膜上；5％脱脂奶粉封
闭4℃ 12 h；将硝酸纤维膜剪成2条，每1个上样孔
为1条，分别置于一抗为1：500稀释的兔抗8R—
MUCF1r血清和1：500稀释的MUC1核心肽单克隆抗
体中，室温2 h；PBS洗5 min×3次；二抗分别为
1：500稀释的过氧化物酶标记的羊抗兔IgG和1：500
稀释的过氧化物酶标记的羊抗鼠I ，室温2 h；PBS
洗5 min×3次；DAB显色。